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    圓腹雅羅魚

    染色體

    采集地點:天津市,換新水產(chǎn)良種場

    測樣日期:2007年

    取樣部位:腎

    取樣數(shù)量:6尾

    檢測單位:天津市換新水產(chǎn)良種場

    實驗方法:體內(nèi)注射小牛血清和秋水仙素短期培養(yǎng),經(jīng)低滲、固定、低片,干凍玻片制片,吉姆薩染色。

    圖片說明:染色體中期核型

    性別:雌、雄

    染色體數(shù):2n=50

    核型方式:2n=18m+22sm+4st+6t


    mtDNA分析

    (1)

    采集時間:1981-1985年

    樣品來源:新疆賽里木湖

    取樣部位:肌肉組織

    樣本數(shù):2尾巴

    實驗技術(shù):PCR擴增

    目的基因:mtDNA Cytb

    引物信息::L14724:5’ 一G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G一 3’

    H15149:5 ’一C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC一3’

    擴增條件:

    擴增反應總體積為50微升,其中含有50 ng的模板DNA,2.5 U的Taq DNA聚合酶,1×buffer,每種引物濃度分別為0.2 μmol/L,dNTP濃度為100μmol/L,Mg 濃度為1.5 mmol/L。PCR擴增反應在PE PTC一100 熱循環(huán)儀上進行。反應條件為:95℃ 2 min后進行36個循環(huán)的94℃ 30 S、49℃ 30 S、72℃ 1 min。之后,反應于72℃延伸10 min,4℃結(jié)束。

    擴增片段大小:489bp

    圖片說明:高體雅羅魚等三種雅羅魚mtDNA Cytb擴增結(jié)果

    參考文獻:

    胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA細胞色素b序列的差異與系統(tǒng)進化 [J]. 動物學雜志, 2005, 40 (3) 6 .

    (2)

    采集時間:1981-1985年

    樣品來源: 新疆賽里木湖

    取樣部位:肌肉

    樣本數(shù):1尾

    實驗技術(shù):PCR擴增

    目的基因:mtDNA D-loop

    引物信息:

    P2-U(5’ -TTAACTCCCAC—CCCTGGCT-3’ )

    P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’


    擴增條件:

    擴增反應總體積為50 uL,其中含有50 ng的模板DNA,1.6 U的Taq DNA聚合酶,1 X Bufer,每種引物濃度分別為0.2μmol/L,dNTP濃度為100pmol/L,Mg離子濃度為1.5 pmol/L。PCR擴增反應在PE PTC-100 熱循環(huán)儀上進行。反應程序為:95℃ 2 min;94℃ 30 S,51℃ 30 S,72℃ 1 min 30 S,進行35個循環(huán);最后再72℃延伸10 min,4℃結(jié)束。

    擴增片段大小:827bp

    參考文獻:

    胡文革,段子淵,王金富等. 新疆3種雅羅魚線粒體DNA控制區(qū)序列的差異和系統(tǒng)進化關(guān)系 [J]. 遺傳學報, 2004, 31 (9) 6 .


     
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